王青华,孙晓晖,唐旭,万婧倞,徐长安.深海贝莱斯芽孢杆菌 DH82 的筛选、鉴定及其抗菌粗蛋白性质分析[J].海洋通报,2019,(1):63-69
深海贝莱斯芽孢杆菌 DH82 的筛选、鉴定及其抗菌粗蛋白性质分析
Screening and identification of Bacillus velezensis strain DH82 and the characterization of the crude antimicrobial protein
投稿时间:2018-11-20  修订日期:2018-12-28
DOI:10.11840/j.issn.1001-6392.2019.01.009
中文关键词:  深海微生物  贝莱斯芽孢杆菌  抗菌粗蛋白  拮抗  迟缓爱德华氏菌
英文关键词:Deep sea bacteria  Bacillus velezensis  Crude antimicrobial protein  Inhibition  Edwardsiella tarda
基金项目:“十三五”厦门市海洋经济创新发展示范项目 (16CZP016SF13;16CZY009SF05;16CZP017SF06); 中国 APEC 基金项目(HV180101);“十三五”烟台市海洋经济创新发展示范项目 (YHCX-SW-L-201703)
作者单位E-mail
王青华 自然资源部第三海洋研究所 国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心福建 厦门 361005 wangqinghua@tio.org.cn 
孙晓晖 自然资源部第三海洋研究所 国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心福建 厦门 361005 xuchangan@tio.org.cn 
唐旭 自然资源部第三海洋研究所 国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心福建 厦门 361005  
万婧倞 自然资源部第三海洋研究所 国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心福建 厦门 361005  
徐长安 自然资源部第三海洋研究所 国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心福建 厦门 361005  
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中文摘要:
      本研究从西太平洋雅浦海沟 6 000 m 深的水样中分离得到 106 株深海细菌,其中筛选到一株能较强拮抗迟缓爱德华氏菌等水产致病菌的 DH82 菌株。采用 16S rDNA 和 gyrB 基因 (NCBI 登录号:MK203035 与 MK203036) 分子生物学分析, 结合形态学和生理生化特性,鉴定 DH82 菌株为贝莱斯芽胞杆菌 Bacillus velezensis。对其抗菌粗蛋白性质进行研究发现:该粗蛋白具有较好热稳定性,在 100 益,处理 30 min 后,仍有 85.5 %抑菌活性;木瓜蛋白酶、蛋白酶 K、胃蛋白酶及胰蛋白酶对粗蛋白影响不显著;粗蛋白在 pH7.0 条件下抑菌活性最佳;金属离子 K+和 Na+对粗蛋白抑菌活性有促进作用,Mg2+、Ca2+及 Fe3+等多价金属离子对粗蛋白抑菌活性有抑制作用。
英文摘要:
      In this study, 106 bacterial strains were isolated from the sea water samples of Western Pacific Yap trench at the depth of 6 000 m, among which, a bacterial strain DH82 with high inhibition activity against the aquatic pathogenic bacteria Edwardsiella tarda was investigated. Based on the morphological, physiological and biochemical characteristics and analysis of 16S rDNA (NCBI accession number: MK203035) and gyrB gene sequence (NCBI accession number: MK203036), the strain DH82 was identified as Bacillus velezensis. The antimicrobial properties of the harvested crude protein were investigated. The results showed that the crude protein had a good thermostability. The crude protein was observed with 85.5 % remained antimicrobial activity after boiling treatment at 100 益 for 30 min, and performed no significant difference with the treatment of the protease including papain, protease K, pepsin and trypsin. The optimum pH for inhibiting Edwardsiella tarda was 7.0. The crude antimicrobial protein activity could be enhanced by metal ions K+ and Na+ , whilst be inhibited by metal ions Mg2+, Ca2+ and Fe3+.
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